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案例说明
木蝴蝶配方颗粒试样经50%甲醇溶液超声提取后，采用梯度洗脱，在276nm处用紫外检测器检测。木蝴蝶配方颗粒应呈现6个特征峰。
分析条件
色谱柱：Kromasil EternityXT-5-C18，4.6x250mm （订货号：X05CLA25）
流动相：（A）乙腈 （B）0.2%醋酸溶液
按下表进行梯度洗脱：
时间/min | 流动相A（%） | 流动相B（%） |
0 | 12 | 88 |
5 | 17 | 83 |
30 | 28 | 72 |
55 | 90 | 10 |
60 | 100 | 0 |
流速：0.8mL/min
进样量：5μ尝
柱温：25℃
波长：276nm
分析图谱
依据上述色谱条件，分别将参照物溶液与供试品溶液注入液相色谱仪进行测定。参照物溶液的色谱图如图1所示，色谱图积分结果见表1
表1 参照物溶液色谱图积分结果
目标物 | 保留时间 | 峰面积 | 峰高 | 理论塔板数 | 分离度 | 对称/拖尾因子 |
(S)木蝴蝶苷B | 22.017 | 1246.602 | 109.209 | 88079 | - | 1.09 |
黄芩苷 | 27.258 | 1942.420 | 154.767 | 114402 | 16.94 | 1.22 |
黄芩素 | 42.025 | 3238.073 | 479.282 | 969814 | 59.91 | 1.17 |
由表1中数据可知，木蝴蝶苷B的理论塔板数为88079，满足《木蝴蝶配方颗粒》中规定的不低于5000的要求。
供试品溶液的色谱图如图2所示，色谱图积分结果见表2，特征峰相对保留时间结果见表3
表2 供试品溶液色谱图积分结果
目标物 | 保留时间 | 峰面积 | 峰高 | 理论塔板数 | 分离度 | 对称/拖尾因子 | |
1(S):木蝴蝶苷B | 22.075 | 2874.583 | 253.552 | 88626 | - | 1.06 | |
2:黄芩苷 | 27.358 | 892.094 | 70.761 | 116014 | 17.11 | 1.20 | |
3 | 29.242 | 3709.902 | 299.830 | 132348 | 5.86 | 1.04 | |
4 | 34.292 | 485.051 | 36.283 | 156500 | 15.12 | 1.13 | |
5:黄芩素 | 42.058 | 1154.274 | 170.798 | 963689 | 29.99 | 1.15 | |
6 | 47.000 |
| 59.950 | 1088085 | 28.12 | 1.12 |
表3 特征峰相对保留时间结果表
目标物 | 保留时间 | 相对保留时间测定值 | 相对保留时间规定值 | 偏差 |
1(S):木蝴蝶苷B | 22.075 | - | - | - |
2:黄芩苷 | 27.358 | 1.24 | 1.26 | -1.59 |
3 | 29.242 | 1.32 | 1.34 | -1.49 |
4 | 34.292 | 1.55 | 1.60 | -3.13 |
5:黄芩素 | 42.058 | 1.91 | 2.06 | -7.28 |
6 | 47.000 | 2.13 | 2.30 | -7.39 |
由表2和表3中数据可知，木蝴蝶配方颗粒供试品溶液的特征峰个数为6个，与《木蝴蝶配方颗粒》中规定的特征峰个数一致；峰2、峰3、峰4、峰5、峰6与S峰的相对保留时间分别为1.24、1.32、1.55、1.91和2.13，均在规定值的
±8%以内。
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